隨著功能性食品的興起,食品科學家和營養(yǎng)學家開發(fā)了一系列特定健康益處的食品,如降糖低GI,改善體重或皮膚管理等。而對于其中一個重要功能:個性化營養(yǎng),開發(fā)能夠根據(jù)個體需求提供最佳營養(yǎng)吸收的食品變得尤為重要,需要深入理解蛋白質(zhì)在人體消化系統(tǒng)中的行為,包括其在胃中的消化過程。
人工胃液通常被用來在體外模擬胃中的消化環(huán)境,藥典建議“取稀鹽酸16.4ml,加水約800ml與胃蛋白酶1Og,搖勻后,加水稀釋成1000ml,即得”[1]。而在食品和營養(yǎng)學科,人工胃液要求更接近現(xiàn)實,比如采用仿生模擬裝置,或者模擬胃液的組成[2],除了HCl和胃蛋白酶,還包括其他成分,如胃粘液或食物基質(zhì),以更準確地模擬胃中的消化環(huán)境。
同時,在一些消化過程研究中,比如在蛋白中加入外源物質(zhì)[3],或是構(gòu)建復合水凝膠包埋體系[4],低場核磁技術(shù)已用于解釋被消化物質(zhì)不同類型的水分子(如自由水、弱結(jié)合水和結(jié)合水)具有不同的弛豫特性,即為食品中水分的分布及其遷移特性的經(jīng)典研究。
與造影劑的弛豫率原理類似,人工胃液弛豫率也是受到樣品中水質(zhì)子的化學環(huán)境和物理動態(tài)的影響,主要為蛋白質(zhì)與水分子的相互作用,以及pH值對水質(zhì)子動力學的影響。本實驗通過測量弛豫率(R1和R2),并找出蛋白質(zhì)濃度、氫離子濃度(pH值的反映)與其之間的相關(guān)性,可以建立數(shù)學模型,預測蛋白質(zhì)在不同pH值(胃酸環(huán)境)下的消化程度。
實驗過程:
1、制備樣品。制備兩種濃度的乳清蛋白分離物(Whey Protein Isolated, WPI)凝膠,分別為15wt%和20wt%,放入標準配方的模擬胃液(pH=1.5,37℃)。
2、數(shù)據(jù)采集。選取采集時間(消化開始前t=0min,30min內(nèi)每隔5min,30min-120min內(nèi)每隔30min),使用pH計測量樣品的pH值,使用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白質(zhì)濃度。弛豫率測試方法:使用CPMG序列測量T2弛豫時間,CWFP序列[5]測量T1弛豫時間,從而得到R2=1/T2,R1=1/T1。
實驗結(jié)果:
使用統(tǒng)計軟件進行線性回歸分析,建立R1和R2與蛋白質(zhì)濃度和pH值[H+]之間的經(jīng)驗方程。
R2 = 0.46 + 0.05 · c_protein ? 1.31 · c_protein·[H+] (R2 = 0.99)
R1 = 0.41 + 0.006 · c_protein ? 0.02 · c_protein·[H+] (R2 = 0.96)
本文描述了一種新的方法,在針對消化功能異常(如胃酸分泌不足或過量)的人群開發(fā)功能性食品時,通過弛豫率、蛋白質(zhì)濃度、pH值的經(jīng)驗方程,可實現(xiàn)個性化服用或配方定制,達到精準營養(yǎng)的目的。
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[1]?中華人民共和國藥典,2020年版,四部,0921崩解時限檢查法,附注.
[2] Deng, R., Seimys, A., Mars, M., Janssen, A. E. M., & Smeets, P. A. M. (2022). Monitoring pH and whey protein digestion by TD-NMR and MRI in a novel semi-dynamic in vitro gastric simulator (MR-GAS). Food Hydrocolloids, 125, 107393.
[3] 劉曉艷,葉月華,白衛(wèi)東,等. 外源物質(zhì)對低鹽羅非魚糜蛋白構(gòu)象及體外消化特性的影響 [J]. 食品工業(yè)科技,2024,45(1):80?87.
[4] 劉治芹, 陳俊亮, 任廣躍, 等. 基于明膠/六偏磷酸鈉/谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶復合水凝膠包埋體系的構(gòu)建及作用機理[J]. 食品科學, 2023, 44(16): 81-90.
[5] Fabíola Manhas Verbi Pereira, Sérgio Bertelli Pflanzer, Thaísa Gomig, Carolina Lugnani Gomes, Pedro Eduardo de Felício, Luiz Alberto Colnago,Fast determination of beef quality parameters with time-domain nuclear magnetic resonance spectroscopy and chemometrics,Talanta,Volume 108,2013,Pages 88-91,ISSN 0039-9140.
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